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其林貝爾

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其林貝爾GL-3250C對免疫吸附分析

返回列表 來源:未知 發布日期:2020-07-08 09:21【

1 材料與方法


主要儀器設備:UV-2600紫外可見分光光度計 [島津企業管理(中國)有限公司]、Moshot MSX2型 倒置顯微鏡(廣州市明美光電技術有限公司)、Infinite M200型酶聯檢測儀(瑞士TECAN公司)、CO2培 養箱(美國Thermo Fisher Scientific公司)、Agilent 6890N型氣相色譜儀(美國Agilent公司)、GL-3250C 型磁力攪拌器(海門市其林貝爾儀器制造有限公 司)和移液器(德國Eppendorf公司)。


2 結果與分析


將載體蛋白BSA、OVA、合成半抗原及偶聯產 物分別用PBS緩沖液調整濃度至1.0 mg/mL后,進行 紫外吸收光譜掃描。對硫磷合成半抗原 Hapten-PA、BSA和OVA的最大吸收峰分別在283、 285和286 nm處;免疫抗原PA -BSA、包被抗原PA - OVA的吸收曲線與相應的半抗原及載體蛋白相比, 均發生明顯改變;PA-BSA和PA-OVA與各自載體蛋 白相比,在283~286 nm最大吸收峰的吸光值明顯不 同,表明人工抗原合成成功。在融合前4 d進行小鼠血清效價與抑制率檢測, 篩選效價高、抑制好的小鼠加強免疫。 融合小鼠的血清效價為8×103 ,當包被抗原PA-OVA (1.0 mg/mL)按1∶2000稀釋、血清按1∶4000稀釋時, 該融合小鼠血清對100 ng/mL對硫磷的抑制效率可 達50%,因此選擇該稀釋濃度下的抗原抗體組合進 行后續細胞篩選。






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